Discussion and application of performance verification methods for Kehua nucleic acid testing systems
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Key words:
- nucleic acid /
- performance verification /
- limits of detection /
- specificity /
- accuracy
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表 1 特异性、准确度性能验证血清盘组成
编号 项目 含量 编号 项目 含量 P01B HBV DNA 120 IU/mL P19C HCV RNA 20 000 IU/mL P02B HBV DNA 120 IU/mL P20N NHP N/A P03I HIV-1 RNA 20 000 IU/mL P21I HIV-1 RNA 20 000 IU/mL P04N NHP N/A P22I HIV-1 RNA 2000 IU/mL P05C HCV RNA 20 000 IU/mL P23N NHP N/A P06B HBV DNA 2000 IU/mL P24C HCV RNA 20 000 IU/mL P07I HIV-1 RNA 2000 IU/mL P25N NHP N/A P08B HBV DNA 2000 IU/mL P26B HBV RNA 20 000 IU/mL P09C HCV RNA 200 000 IU/mL P27B HBV RNA 20 000 IU/mL P10N NHP N/A P28N NHP N/A P11B HBV RNA 20000 IU/mL P29B HBV RNA 120 IU/mL P12C HCV RNA 1200 IU/mL P30C HCV RNA 20 000 IU/mL P13I HIV-1 RNA 20 000 IU/mL P31I HIV-1 RNA 20 000 IU/mL P14B HBV RNA 200 000 IU/mL P32C HCV RNA 1200 IU/mL P15N NHP N/A P33C HCV RNA 20 000 IU/mL P16B HBV RNA 2000 IU/mL P34N NHP N/A P17C HCV RNA 1200 IU/mL P35C HCV RNA 20 000 IU/mL P18B HBV RNA 2000 IU/mL P36I HIV-1 RNA 2000 IU/mL 注：另外含180支HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA阴性样本。 
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表 2 最低检出限验证血清盘组成
项目 HBV DNA HCV RNA HIV-1 RNA 50%检出限 2.5 IU/mL
(20支)25 IU/mL
(20支)25 IU/mL
(20支)95%检出限 5.0 IU/mL
(20支)50 IU/mL
(20支)50 IU/mL
(20支)100%检出限 7.5 IU/mL
(20支)75 IU/mL
(20支)75IU/mL
(20支)合计 180支标本
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表 3 标准物质及样本稀释量
项目 单检模式 混检模式 HBV DNA HCV RNA HIV RNA HBV DNA HCV RNA HIV RNA 标准物质原浓度/(IU·mL-1) 200 1000 1000 200 1000 1000 说明书声称的下限/(IU·mL-1) 5 50 50 30 300 300 1次检测需要样本量/mL 1.8 1.8 1.8 0.4 0.4 0.4 20次检测需要样本量估算/mL 40 40 40 9 9 9 标准物质体积/mL 1 2 2 1.35 2.7 2.7 阴性血浆体积/mL 39 38 38 7.65 6.3 6.3 稀释后终浓度/(IU·mL-1) 5 50 50 30 300 300
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表 5 血清盘验证最低检出限验证结果
% 检测项目 50%检出限水平 95%检出限水平 100%检出限水平 HBV DNA 80 100 100 HCV RNA 60 95 100 HIV RNA 80 100 100
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表 6 标准物质稀释验证最低检出结果
项目 单检结果 混检结果 项目 单检结果 混检结果 项目 单检结果 混检结果 HBV DNA01 + + HCV RNA01 + + HIV RNA01 + + HBV DNA02 + + HCV RNA02 + + HIV RNA02 + + HBV DNA03 + + HCV RNA03 + + HIV RNA03 + + HBV DNA04 + + HCV RNA04 + + HIV RNA04 + + HBV DNA05 + + HCV RNA05 + + HIV RNA05 + + HBV DNA06 + + HCV RNA06 + + HIV RNA06 + + HBV DNA07 + + HCV RNA07 + + HIV RNA07 + - HBV DNA08 + + HCV RNA08 + + HIV RNA08 + + HBV DNA09 + + HCV RNA09 + + HIV RNA09 + + HBV DNA10 + + HCV RNA10 + + HIV RNA10 + + HBV DNA11 + + HCV RNA11 + + HIV RNA11 + + HBV DNA12 + + HCV RNA12 + + HIV RNA12 + + HBV DNA13 + + HCV RNA13 + + HIV RNA13 + + HBV DNA14 + + HCV RNA14 + + HIV RNA14 + + HBV DNA15 + + HCV RNA15 + + HIV RNA15 + + HBV DNA16 + + HCV RNA16 + + HIV RNA16 + + HBV DNA17 + + HCV RNA17 + + HIV RNA17 + + HBV DNA18 + + HCV RNA18 + + HIV RNA18 + + HBV DNA19 + + HCV RNA19 + + HIV RNA19 + + HBV DNA20 + + HCV RNA20 + + HIV RNA20 + + 检出率 100% 100% 检出率 100% 100% 检出率 100% 95% 注：单检1~20；混检1~20为Pool。
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表 7 干扰物质验证结果
标本类型 HBV DNA(5 IU/mL) HCV RNA(30 IU/mL) HIV RNA(30 IU/mL) 结果1
(+/-)结果2
(+/-)结果3
(+/-)结果1
(+/-)结果2
(+/-)结果3
(+/-)结果1
(+/-)结果2
(+/-)结果3
(+/-)用正常血浆稀释至3倍LOD + + + + + + + + + 用溶血浆稀释至3倍LOD + + + + + + + + + 用脂血血浆稀释至3倍LOD + + + + + + + + +
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